Þéttingar- og mengunarmál í multiwell frumuræktarplötum

Hleðsla og meðhöndlun á fjölholum frumuræktarplötum:

Frumuræktunarplötan fylgir einnig meginreglunni um strangar aspsisýkingar þegar frumuaðgerðir eru framkvæmdar. Allar aðgerðir verða að vera staðlaðar og vísindalegar og munu ekki valda frekari áhrifum á frumuvöxt. Algengasta vandamálið er hvernig á að tryggja einsleitni frumanna eftir að sýnið hefur verið bætt við og lágmarkað áhrif þess að breyta miðli á vaxtarástand frumanna.

Spurðu:
Hetturnar af 96 og 24 holu ræktunarplötum eða petri diskar eru mjög lausir, sem er þægilegt fyrir loftræstingu, en munu bakteríur, mygla og önnur mengunarefni einnig renna inn?

Svar:
Lokið er mjög laust, sem tilheyrir hálfopinni menningu, og tilgangurinn með þessu er að loftræsta (í raun er það að gera CO2 utan ræktunarréttarinnar að fullu skiptast á ræktunarréttinum og viðhalda pH gildi menningarinnar Miðlungs).
Allt hefur kosti og galla, sem auðvitað eykur möguleikann á mengun. Að auki veldur þetta að vökvinn í réttinum gufar upp, sem er athyglisvert fyrir nákvæman skömmtun lyfja. Þess vegna eru eftirfarandi tvær ráðstafanir nauðsynlegar: a. Loftið í útungunarstöðinni verður að vera hreint (venjulegt útfjólublátt ljós, áfengisskúra og útungunarstöðin ætti að opna og loka eins lítið og mögulegt er) b. Raki í útungunarstöðinni verður alltaf að halda við 100% (vaskinn með sæfðu eimuðu vatni sem er sett í útungunarstöðina).
Rétt eins og Petri-réttur, þá er hann líka ílát með á hvolf og það verður ekki mengað. Aðallega vegna neikvæðs þrýstings loftstreymisins sem myndast við „L“ brún hlífarinnar eru örverur festar við rykið og rykið sem loftstreymið hefur ekki farið í gegnum brún hlífarinnar sem býr til neikvæðan þrýsting. Loftræstingaráhrifin eru aðeins með dreifingu lofts og ekkert loftstreymi myndast, svo það mun aðeins anda og ekki komast í bakteríur.

Spurðu:
Með því að nota 24 holu plötu eru aðgerðir í sumum holunum (í öfgafullu hreinu bekknum) og það eru frumur sem á að rækta í öðrum holum. Ég hef áhyggjur af því að þetta valdi mengun. Ég veit ekki hvað ég á að huga að?

Svar:
Ef aðgerðin er stöðluð í öfgafullu hreinsibekknum ætti það að vera í lagi. Ég held að þú getir nýtt þér forsíðu ræktunarplötunnar að fullu, reynt að afhjúpa aðeins götin sem á að reka og hylja aðrar göt með hlífum.
Hugleiddu ítarlega fyrir notkun og nýttu öll götin að fullu; Ef þú þarft aðeins að nota nokkrar holur geturðu aðeins notað eina hliðina og hyljið afganginn með hlíf. Ég er vanur að nota réttu gatið fyrst (það er þægilegt að bæta sýnum til hægri handar).

Þegar þú starfar skaltu nota nokkrar glerskyggnur til að hækka aðra hlið borðsins, ekki opna hlífina alveg, yfirleitt ekkert vandamál.
Ójafn dreifingu frumna og lausnir

Spurðu:
Frumur eru sáð á ræktunarplötunni og frumurnar safnast alltaf saman í útlæga hlutanum, hvernig á að takast á við það?

Svar:
Má ég spyrja hvernig frumur þínar séu blandaðar? Er það pipetting eða hristir menningarplötuna? Ef það er hið síðarnefnda, og ef það er hrist í hring, er mjög líklegt að frumunum verði hent á jaðarhlutann vegna miðflóttaaflsins, sem leiðir til færri frumna í miðjunni. Meira en fjórar vikur!
Hér er góð leið: áður en þú ræktar fræplötuna skaltu setja ræktunarplötuna í útungunarvélina í nokkrar klukkustundir af mettun og taka það síðan út. Krafturinn ætti að vera léttur við plöntur frumanna. Með því að bæta við leyfir fruman sviflausn að renna inn í holur plötunnar og ræktuðu frumurnar vaxa í grundvallaratriðum jafnt. Mundu að hrista aldrei með hristara, eða frumurnar þínar klumpast saman eins og þú sagðir.
Því minni sem gat þvermál ræktunarplötunnar, því augljósara er þetta fyrirbæri. Þetta fyrirbæri er óhjákvæmilegt fyrir 24 og 96 holu plötur, vegna þess að vökvinn festist við vegginn þannig að ræktunarlausnin í holunni myndar ekki fljótandi stig, en jaðarinn er hár, rétt eins og íhvolfur spegill. Hins vegar, þegar notaðar eru þessar tvenns konar gatplötur, er ekki mögulegt að bæta við nægilegu magni af ræktunarlausn vegna þess að þörf er á frekari íhlutun, þannig að frumurnar birtast „Edge Collection“ ásamt ræktunarlausninni. Það fer eftir því hvaða vísbendingar þú þarft að fylgjast með. Ef það er MTT mun ónæmisheilbrigðafræði hafa áhrif á niðurstöðurnar vegna frumulaga.
Þegar þú meltir frumur skaltu fylgjast með því að pipetta jafnt til að forðast klefa klumpa og magn ræktunarlausnar í holunni ætti að vera nægjanlegt. Almennt skaltu bæta við nægri ræktunarlausn þegar sáð er og breyta lausninni einu sinni þegar íhlutun er bætt við. Magn ræktunarlausnarinnar sem bætt er við íhlutunarlausnina er jafnt magn ræktunarlausnarinnar við sáð, í þessu tilfelli, fyrirbæri „Edge Set“ verður bætt, svo þú gætir eins prófað það.

Spurðu:
Það sem ég gerði var að gera tilraun til myndunar. Best er að dreifa frumunum í samræmdu lagi. Flest götin eru fín þegar vírusinn er sáð og sum þeirra eru ekki einsleit. Það er mikill munur á frumuhópnum. Mig langar að spyrja þig hvaða aðferð þú notar þegar þú bætir við frumum?

Svar:
Það er mikilvægt að pípettu frumurnar í einfrumu fjöðrun eftir meltingu! Gakktu úr skugga um að fjöldi frumna í hverri holu sé í samræmi þegar þú skiptir plötunni!
Auðvitað eru einnig vinnsluþættir. Samhliða holurnar eru einnig mjög mikilvægar. Til dæmis, þegar þú bætir við lyfjum, blandaðu lyfinu eftir þynningu til að tryggja að styrkur hverrar holu sé í samræmi!
Ennfremur, þegar það er bætt við frumum og lyfjum, ætti að bæta við prófunarhópnum og samanburðarhópnum aftur á móti til að forðast mismuninn á frumuþéttleika og styrk lyfja af völdum röð þess að bæta við sýnum!

Spurðu:
Breytingin er þegar einsleit, en plankinn, 6 holur og 24 holur eru alltaf nokkuð ójöfn og svolítið einbeitt í miðjunni. Ennfremur er augljóst að talningin er gerð og eftir einn dag eða tvo er þéttleiki hverrar holu mismunandi, sem mun hafa áhrif á uppgötvunina. Er til góð leið?

Svar:
Ef þú notar pasteur pípettu, ekki sjúga of mikið í hvert skipti, vegna þess að frumurnar í pípettu munu sjálfkrafa sökkva, oft er fjöldi frumna í fyrstu holunum stór og frumusviflausnin er oft einsleit og vökvinn mun Fylgdu S-formleiðinni.
Ef þú notar pípettu ætti að vinna úr ráðunum og fjarlægja til að forðast að skemma frumurnar, þannig að í hvert skipti sem vökvinn er tekinn samsvarar holu. Það er réttara að bæta við einu til einu holu með þjórfé. En einnig gaum að því að blanda fjöðruninni.

Til að setja upp samhliða hóp verður N að vera nógu stór (þú getur reiknað hann).

Ekki hrista eftir málun þar sem hristing mun valda því að frumur safnast saman í miðju. Best er að planka einu sinni.

Porous frumuræktunarplata Yongyue Medical hefur alltaf litið á gæðaeftirlit sem líf fyrirtækisins og stundað stöðuga endurbætur á samkeppnishæfni fyrirtækisins. Fyrirtækið fylgir alltaf fyrirtækinu anda að hlýða lögum og reglugerð þarfir viðskiptavina að mestu leyti. . Win-Win með viðskiptavinum er þróunarmarkmið okkar. Yongyue Medical! Traust félagi þinn. Við erum tilbúin að vinna innilega með þér til að skapa betri framtíð.